De to ikoniske rørlegger-brødrene Mario og Luigi er hovedpersonene i et ellevilt eventyr gjennom Soppriket. Sammen med Prinsesse Peach og Toad leter Mario etter Luigi, som har blitt bortført av den onde Koopa-kongen Bowser. Filmen er basert på Nintendos populære spillserie, og fansen vil kjenne igjen ikoniske elementer fra retro-spillene fra 80- og 90-tallet, samt mer moderne materiale fra Mario Kart. De norske stemmene gestaltes av blant andre Christopher Robin Omdahl, Jakob Oftebro, Jeppe B. Laursen, Victor Sotberg, Gulla Nordmoen, Nahom Feshatzion og Johannes Joner.